Реферат на тему:


Воспользуйтесь поиском к примеру Реферат        Грубый поиск Точный поиск






Загрузка...
Общая характеристика работы

Институт эндокринологии и обмена веществ

им. В.П. Комиссаренко АМН УКРАИНЫ

конах Валентина Николаевна

УДК 616.441-002-036.12-08: 615.36.013.395.

КЛИНИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА
ЭФФЕКТИВНОСТИ ЭРБИСОЛ У БОЛЬНЫХ
НА аутоиммунный тиреоидит

14.01.14 эндокринология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

кандидата медицинских наук

Киев 2001

Актуальность темы исследования.

Работа выполнена в Национальном медицинском университете им. А.А. Бого-Мольц МОЗ Украины.

Научный руководитель:

Заслуженный деятель науки и техники Украины, доктор медицинских наук, профессор Боднар Петр Николаевич, Национальный медицинский университет им. А.А. Богомольца, заведующий кафедрой эндокринологии

Официальные оппоненты:

доктор медицинских наук, профессор, член-корреспондент АМН Украины Эпштейн Евсей Владимирович, Институт эндокринологии и обмена веществ им. В.П. Комиссаренко АМН Украины, заведующий лабораторией функциональной диагностики;

кандидат медицинских наук Савран Елена Валерьевна, Украинский научно-практический центр эндокринной хирургии, трансплантации эндокринных органов и тканей МЗ Украины, руководитель отдела клинической эндокринологии

Ведущая организация:

Ивано-Франковская Государственная медицинская академия, кафедра эндокринологии, МЗ Украины, г.. Ивано-Франковск

Защита состоится 25.12.2001 года в 14 часов на заседании диссертационного совета Д 26.558.01 в Институте эндокринологии и обмена веществ им. В.П. Комиссаренко АМН Украины по адресу: 04114, Киев-144, ул. Вышгородская, 69

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Института эндокринологии и обмена веществ им. В.П. Комиссаренко (г.. Киев, ул. Вышгородская, 69)

Автореферат разослан 24.11.2001 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета

доктор биологических наук Калинская Л.М.

Общая характеристика работы

Актуальность томы. Проблема аутоиммунного тиреоидита (АИТ) занимает ведущее место в эндокринологии. По данным популяционных опыт-жень эта патология является одной из наиболее частых в структуре эндокринных заболеваний [Караченцев Ю.И., 1998; Мамич В.И. и соавт., 1995]. Явные формы АИТ составляют в популяции 1%, а субклинические оказываются в
10-15% практически здоровых лиц [Weetman A.P., McGregor A.M., 1994; Петунин Н.А. и соавт., 1997]. Но самым важным является то, что в тепериш-него времени все еще не существует надежных, а главное, этиопатогенетических методов лечения АИТ. Общепринятым способом лечения этой болезни является терапия препаратами тиреоидных гормонов, в частности L-тироксы-ном. Целесообразность применения последнего на этапах развития гипота-ре-ОЗУ неоспорима, но не совсем обоснована для эутиреоидного состояния, поскольку в целом не препятствует прогрессированию АИТ [Петунин Н.А. и соавт., 1997]. При этом L-тироксин оказывает иммуномодулирующее действие, подавляет синтез специфических аутоантител, тормозит экспрессию антигенов щитовидной железы и уменьшает антигенные свойства тиреоглобулину [Балаболкин М.И., 1998].

Поскольку АИТ является типичным представителем органоспецифического аутоиммунного заболевания, неоднократно предпринимались попытки лечения этой болезни иммуносупрессивными или иммуностимулирующими средствами [Miller J.F.A.P. et all., 1992; Volpe R., 1990; Матяшина И. и соавт., 1992]. Однако их терапевтическая эффективность оказалась не существенной, что закономерно породило недоверие к методам иммунотерапии аутоиммунного тиреоидита. Большинство исследований этого направления были проведены в 80-х и в начале 90-х годов, и, как правило, они носили эмпирический характер.

Последние годы ознаменовались достижениями в области тиреоид-логии. Окончательно доказано, что АИТ по всем признакам является мультифакторной заболеванием, формирование которого обусловлено взаимодействием факторов окружающей среды с наследственной предрасположенностью. При определенных условиях это взаимодействие и индуцирует аутоагрессию, которая приводит к постепенному и полному уничтожению тиреоцитов [Weetman A.P., McGregи гипотиреоз "кафедры эндокринологии Национального медицинского университета (номер госрегистрации 0197V004065). Диссертант при выполнении данной НИР, как исполнитель, занималась исследованиями, результаты которых легли в основу при оформлении диссертации.

Цель исследования. Дать оценку действия эрбисола на процессы формирования аутоиммунного тиреоидита у людей и определить возможность применения этого препарата в клинической практике.

Задачи исследования:

1. Изучить особенности течения аутоиммунного тиреоидита под влиянием лечения Эрбисолом.

2. Исследовать характер неспецифических иммунных нарушений у больных АИТ при применении эрбисола.

3. Изучить влияние эрбисола на уровень в крови цитокинов макро- фагального и Т-хелперного происхождения у больных АИТ.

4. С выяснить особенности морфо-функциональных характеристик лимфоцитов крови у больных АИТ, которые получали ЭРБИСОЛ.

5. Определить возможность использования эрбисола как специфического лечебного средства при аутоиммунном тиреоидите.

Об Объект исследования: гормональные и иммунологические показатели, характеризующие аутоиммунный тиреоидит.

Предмет исследования: течение аутоиммунного тиреоидита при лечении больных Эрбисолом.

Методы исследования. Для оценки терапевтического действия эрбисола ис-ристовувалы анализ клинических показателей, ультразвуковое исследование (УЗИ), определение тиреоидных гормонов и антитиреоидных антител в крови пациентов. Об интенсивности воспалительного иммунного процесса в щитовидной железе судили по количеству в крови провоспалительных цитокинов интерлейки-
на 1 и тумор-некротического фактора, а о характере иммунного ответа по концентра-ции в крови интерлейкина 4 и интерферона гамма. Состояние иммунной системы изучали по таким показателям, как количество периферических лимфоцитов и их субпопуляций, концентрация иммуноглобулинов основных классов, содержание циркулирующих иммунных комплек-сов и электронно-микроскопическая характеристика лимфоцитов периферич ной крови.

Научная новизна полученных результатов.

1. Инициация разрушения фолликулярных структур щитовидной железы при АИТ осуществляется эффекторами клеточных реакций иммунитета. С антител только антипероксидазни способны проявлять цитотоксичность, при условии нарушения структуры фолликулов. Данное положение вытекает из совокупности прямых и косвенных результатов работы и может рассматриваться как новое подтверждение исключительной роли клеточного иммунитета в формировании АИТ.

2. На ранних этапах развития АИТ иммунное воспаление щитовидной железы сопровождается усиленным синтезом провоспалительных цитокинов (IL-1, TNF?) И IFN ?, что демонстрируется существенным увеличением их концентрации в крови, величина которой может служить маркером интенсивности аутоиммунного процесса. Результаты исследований, на основе которых формулируется это положение, полученные впервые, следовательно, обладают полной новизной.

3. Впервые показано, что на стадии развитого тиреоидита есть реальная возможность существенно приостановить аутоиммунное разрушение щитовидной железы путем активации специфических реакций гуморального иммунитета. Последняя может быть достигнута с помощью эрбисола, который, как было впервые установлено, является средством, который обладает способностью вызывать реверсии иммунного ответа.

4. Общие иммунные сдвиги, характерные для АИТ, являются вторичные, и их генезис д связан с нормальным ответом иммунной системы на факторы стрессовой ситуации, возникающей при воспалении щитовидной железы. Они спонтанно нормализуются при ингибирования аутоагрессии и не требуют специальных мер иммунокоррекции.

Практическое значение полученных результатов. Результаты работы могут быть использованы при дальнейшем изучении вопросов патогенеза АИТ, в частности, для окончательного решения проблемы роли клеточных и гуморальных реакций иммунитета в разрушении щитовидной железы. Они могут быть использованы как базовые и для поиска новых средств и способов реверсии иммунного ответа при данной патологии для разработки принципиально нового направления ее терапии. С научной точки зрения требуют дальнейшего и целенаправленного развития исследования, направленные на изучение механизмов и последствий взаимодействия с АИТ иммунной системы с гипофизарно-тиреоидной оси в плане функционирования щитовидной железы на различных этапах формирования аутоагрессии.

Учитывая терапевтические качества эрбисола, которые были открыты даны-ми исследованиями, его можно рекомендовать для широкого исполь-ва ния при лечении АИТ на первых этапах развития аутоиммунных ного запа-ления щитовидной железы. Есть крайне целесообразным измерения в крови кон-цен-трации IL-1, TNF? и IFN? для мониторинга больных АИТ с целью вы-значение интенсивности аутоагрессии и эффективности примененной терапии.

Личный вклад соискателя. Автором диссертации разработана программа исследований, лично выполнены иммунологические и гормональные исследования, УЗИ щитовидной железы, статистическая обработка материала. Электронно-микроскопические исследования лимфоцитов крови проведенные в Научно-исследовательском лабораторном центре Национального медицинского университета. Определение концентрации цитокинов проводились на базе Украинского научно-практического центра эндокринной хирургии, трансплантации эндокринных органов и тканей МЗ Украины.

Апробация результатов диссертации. Основные положения диссертации докладывались на Киевских городских эндокринологических конференциях (1999, 2000), IV научно-практической конференции "Актуальные вопросы аллергологии, клинической и лабораторной иммунологии" (Киев, 1999), V Укра-ских научно-практической конференции по актуальным вопросам клинической иммунологии и аллергологии (Киев, 2000).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 5 статей в научных журналах, из которых 4 статьи в профессиональных научных изданиях, рекомендованных ВАК Украины, и 5 тезисов-докладов на научно-практических конференциях.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 121 сто-РИНЦ комп ютерного текста, состоит из введения, обзора литературы, 3 глав собственных исследований, анализа и обобщения результатев опыт-жень, выводов, практических рекомендаций, списка использованной литера-туры, содержащий 137 литературных источников, из них отечественных 58, иностранных 79. Диссертация иллюстрирована 19 таблицами и 23 рисунками.

Основное содержание работы

Материалы и методы исследования. Исследование эффективности терапевтического действия эрбисола по сравнению с действием L-тироксина выполнялись с 1997 по 2000 год. Они вполне проведены в условиях амбулаторного лечения больных с их согласия и соблюдением правил приема лекарств и срока повторного обследования. Все больные обратились за помощью впервые и ранее не лечившихся по поводу заболеваний щитовидной железы. Диагноз АИТ устанавливался на основе характерных жалоб пациентов, клинических и лабораторных проявлений АИТ. Все 116 больных АИТ были разделены на 3 группы, которые формировались по принципу рандомизации, согласно обращению больных в поликлинику. Первая группа больных из 30 человек получала L-тироксин в дозе 1,6 мкг / кг массы тела в сутки, вторая группа из 50 человек ЭРБИСОЛ по схеме первые 10 дней по 4 мл, а затем 10 дней по 2,0 мл внутримышечно мышечно 1 раз в сутки, третья группа из 36 больных находилась на комбинированном лечении L-тироксином и Эрбисолом. Случайный подбор больных привел к компоновке однотипных групп больных по возрасту, полу и состоянию функциональной активности щитовидной железы. У большинства больных (102 человека) зарегистрировано эутиреоза, 14 имели явные клинические и лабораторные признаки гипотиреоза. Чаще АИТ развивался у пациентов в возрасте от 25 до 45 лет (63 больных) и в возрасте от 45 до 65 лет (28 больных). Отдельную группу составили практически здоровые доноры в возрасте от 28 до 46 лет 30 человек, служили контролем, в основном при проведении иммунологических исследований.

Об Объектом исследования были сыворотка и форменные элементы крови и сама щитовидная железа. Клинический и лабораторный анализ проводили перед началом лечения и через 1 месяц наблюдения.

Ультрасонографические исследованиябыло выполнено до и после лечения с использованием аппарата HITACHI EUB-310 (Hitachi Medical Corporation, Tokyo, Japan) с линейным электронным датчиком 7,5 МГц. Оценивали ехощильнисть паренхимы щитовидной железы и о объем органа, сравнивали с опубликованными возрастными размерами.

Уровень сывороточных концентраций свободного Т4 и ТТГ определяли иммуноферментным методом с помощью наборов фирмы Boehringer Mann (Германия). Анализ полученных образцов проводили на фотомет-ре ELISA ES-300 (Германия). Количественный уровень антитиреоглобулинових и антитиропероксидаз ных аутоантител измеряли иммуноферментным методом с использованием соответствующих наборов фирмы Boerhringer Mannheim и фотометра ELISA ES-300.

Относительную количество лимфоцитарный субпопуляций крови определяли двумя методами методом розеток [Передерий В.Г. и соавт., 1995] и методом проточной цитофлуорометрии [Segal1 et all., 1987]. Абсолютное их число подсчитывалось с учетом индивидуальных показателей лейкоцитарной формулы. Лимфоцитарным субпопуляции цельной гепарине-ным периферической крови методом двухцветной проточной цитометрии определяли с использованием моноклональных антител (МКА) от Immune Monitoring Kit BDIS (Erembodegem, Belgium). Анализ всех лимфоцитарный субпопуляций проводили с использованием проточного лазерного цитометра FACScan (Bekton Dikinson, USA) и с применением компьютера компьютерные программы SimulSET и FACScan.

В данной работе определяли в сыворотке периферической крови содержание таких цитокинов, как интерлейкин 1? (IL-1 в),? Уморнекротичний фактор (TNF), интерферон? (IFNг): а интерлейкин 4 (IL-4). Их концентрацию устанавливали с помощью стандартных диагностических наборов фирмы "Medgenix" (Бельгия) по технологии, рекомендованной производителем.

Для определения концентрации циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) 200 мкл сыворотки крови смешивали с 5 мл боратного буфера. 4 мл этой смеси добавляли к 4 мл 4% раствора полиэтиленгликоля. Пробирки ставили на 4 годыни в холодильник при 4 ° С. После инкубации пробы цен-трифугувалы при 2000 об / мин в течение 10 минут. Осадок дважды промывали раствором полиэтиленгликоля и растворяли в 5 мл 0,1 N раствора едкого натра. Уровень ЦИК замеряли на спектрофотометре при 280 нм и выражали в единицах оптической плотности [Кайдашев И.П., 1996].

Концентрацию IgA, M и G в сыворотке крови измеряли по методу Манчини [Кайдашев И.П., 1996]. Для этого использовали агарозу и стандартные моноспецифические антисыворотки против иммуноглобулинов. Реакцию проводили на агарозных пластинках. Величину диффузии учитывали через 48 часов с помощью номограммы. Количество иммуноглобулинов вычисляли, используя соответствующие графики зависимости их концентрации от диаметра колец диффузии.

Материалом для электронно-микроскопических исследований была капля крови и лимфоцитарная масса, полученная после центрифугирования крови в градиенте плотности фикол-урографин. Опыты проводили до и после лечения больных. Выделенный материал фиксировали в 1% растворе OsO4 по Колфилдом течение 2:00 при температуре + 4 ° С. Об объекты зневод-ню-вали в этаноле возрастающей концентрации, затем в ацетоне, после чего их заливали в смесь эпоним с аралдитом по общепринятой методике [Каруп В.Я., 1984]. Ультратонкие срезы изготавливали на ультратоми LKB REICHERT. Срезы контрастировали 2% раствором уранилацетатом течение
15 минут и цитратом свинца столько же времени. Фотографирования осуществляли на электронных микроскопах EMB-100 Б и ЭМ-125 К. Морфометрические исследования проводились на полуавтоматическом устройства обработки графических изображений. Определяли такие показатели, как площадь среза лимфоцитов, площадь среза ядра и его фактор формы, ядерно-цитоплазматические соотношения. По каждому из перечисленных показателей определяли среднее значение величины, среднее квадратическое отклонение, погрешность средней, коэффициент вариации и коэффициент точности определения средней отдельно для каждого исследованного пациента.

Статистическую обработку полученных данныхпроводили по методу вариационной статистики с помощью компьютерной ютерного пакета программ Statgrafics. Разницы показателей считали достоверными при значении Р & lt; 0,05, то есть в случаях, когда вероятность различий была более 95%.

Результаты собственных исследований. Типичными жалобами пациентов были: вялость, быстрая утомляемость, снижение трудоспособность ности, сонливость, сухость кожи, отеки лица, зябкость и неприятные чувства в области шеи. Некоторые больные отмечали ухудшение памяти памяти, боли в суставах и м мышцах, одышку.

Ультрасонографические исследование выявило увеличение размеров щитовидной железы, неоднородность эхоструктуры, значительную гипоехогеннисть, гиперэхогенные включения, некоторые из них носят линейный характер (фиброзные прослойки), что придает железе вид дольчатость. У большинства больных наблюдалось появление гиперэхогенным контура вокруг железы, что может свидетельствовать о утолщение капсулы органа. Описанная картина характерна для эутиреоидного состояния больных. При наличии гипотиреоза щитовидная железа уменьшается в о объеме, и на фоне гипоэхогенной ткани выявляются очаги фиброза.

У большинства больных АИТ под влиянием лечения уже через
1 месяц общее состояние улучшалось исчезали неприятные чувства в области шеи, уменьшались слабость, сухость кожи, улучшалась памяти ять, повышалась работоспособность, исчезали отеки лица, а не отмечалась зябкость. Наиболее эффективным в этом отношении оказался L-тироксин, и L-тироксин с Эрбисолом.

Определенное внимание обращают на данные, полученные с помощью Ультрасонографические исследований. L-тироксин приводил к значительному уменьшению о объема щитовидной железы у больных с еутиреоид ной фазой АИТ. Это уменьшение железы статистически значимо, и для правой доли составляет 41,2%, а для левой 27%. В ЭРБИСОЛ такого действия не выявлено, хотя о объем органа и несколько снизился. Впечатляющими результаты, которые были получены при исследовании комбинированногоэффекта обоих препаратов. Оказалось, что их однократное применение не приводит к изменению об объема щитовидной железы, можно рассматривать как своеобразное ингибирования Эрбисолом присущей тироксина гормонального действия на тиреотропную функцию гипофиза. Как оказалось, ни один из препаратов не способен нормализовать ехощильнисть органа, а при применении L-тироксина количество больных с фиброзом железы увеличилась более чем в два раза.

При постоянном приеме L-тироксина у больных закономерно снижается уровень ТТГ, и за счет экзогенного гормона увеличивается концентрация в крови Т4. Неожиданно такое же действие обнаружил и ЭРБИСОЛ. При этом нормализация в крови уровня Т4 может быть эт связана только с процессами активации гормонообразования остаточными тиреоцитах, и не исключено, что именно этот эффект препарата является первичным, что выступает причиной подавления тиреотропного функции гипофиза. Совместное введение эрбисола и тироксина еще в большей степени способствует повышению уровня в крови Т4 с одновременным углублением супрессивной действия

Загрузка...

Страницы: 1 2 3






Ещё Рефераты по вашей теме

Траекторных свойства ГРУПП псевдо-гомеоморфизм ПОЛЬСКИХ ПРОСТРАНСТВ - Автореферат
Надежность и устойчивость коммерческих банков: оценка и регулирования - Автореферат
ОРГАНИЗАЦИЯ СИСТЕМЫ АВТОМАТИЗИРОВАННОГО УПРАВЛЕНИЯ бурения НА ОСНОВЕ Многопараметрические ИНФОРМАЦИОННОЙ МОДЕЛИ - Автореферат
ДЕФОРМИРОВАНИЯ И выпучивания Гладких И подкрепленных цилиндрических оболочек при статических нагрузках (экспериментально-теоретических ИССЛЕДОВАНИЯ) - Автореферат
Технологические основы выращивания кристаллов соединений AIIBVI из расплава под давлением инертного газа - Автореферат
Состояния соматического ЗДОРОВЬЕ "Я И ФАКТОРЫ РИСКА ПО ЕГО НАРУШЕНИЙ У ДЕТЕЙ ШКОЛЬНОГО ВОЗРАСТА - Автореферат
Запорожская наследие на юге Украины последней четверти XVIII - начала XIX века - Автореферат